新型混合模式介质制备及牛初乳免疫球蛋白分离研究

【摘要】混合模式层析是一种新型的生物分离方法,其功能配基兼具多种相互作用模式,吸附容量大,选择性高,洗脱条件温和。本文结合亲硫层析和疏水性电荷诱导层析,筛选新型混合模式配基,制备新介质,并用于牛初乳免疫球蛋白的分离纯化。亲硫层析对免疫球蛋白的特异性吸附需借助高盐浓度实现,而疏水性电荷诱导层析具有非盐依赖的吸附特性,本文结合两者优点,新型配基兼具亲硫作用、疏水作用和静电作用,在高盐和低盐条件下都可以高效吸附免疫球蛋白,且吸附能力随pH改变呈显著变化,可以实现高效洗脱。本文研究包括介质制备、吸附性能测定和牛初乳免疫球蛋白分离三部分。以Bestarose4FF琼脂糖凝胶微球为基质,经二乙烯基砜活化,偶联4-巯基乙基吡啶、2-巯基咪唑、2-巯基-1-甲基咪唑和3-巯基-1,2,4-三氮唑等4种配基,制备了新型混合模式介质,分别命名为Bestarose-DVS-MEP、Bestarose-DVS-MI、Bestarose-DVS-MMI和Bestarose-DVS-MT。优化了基质活化和配基偶联的反应条件,配基密度约为60～70μmol/ml基质,偶联效率约60%。考察了新型混合模式介质对牛初乳免疫球蛋白的静态吸附性能和吸附动力学。结果表明,4种新介质具有吸附容量大和非盐依赖性吸附的特点,增加硫酸盐浓度能加快吸附过程,且对吸附量影响较小。Bestarose-DVS-MEP、Bestarose-DVS-MI和Bestarose-DVS-MMI对pH敏感,pH7吸附容量高,pH4可实现牛初乳免疫球蛋白的解吸。新型混合模式层析从牛初乳蛋白粉溶液中分离免疫球蛋白。比较了不同介质的分离效果,发现Bestarose-DVS-MI是最合适的介质。进一步优化了层析分离条件,选择pH7进样,pH4洗脱,进样浓度25mg/ml,进样量1ml,牛初乳免疫球蛋白纯度达95%,纯化因子为6.2,收率约64.2%。本文筛选出2-巯基咪唑作为混合模式新配基,制备了新型混合模式介质,用于分离牛初乳免疫球蛋白,取得了较好的结果,为牛初乳高附加值产品制备提供了新方法。
【作者】陈振明；
【导师】姚善泾；林东强；
【作者基本信息】浙江大学，生物化工，2014，硕士
【关键词】混合模式层析；吸附剂；免疫球蛋白；牛初乳；

【参考文献】
[1]沙白.西安市文物行政执法工作中面临的文物安全问题和保护方法研究[D].西北大学,文物与博物馆（专业学位）,2014,硕士.
[2]尹汗青,齐航,方菲菲,朱廷,王宝林,魏宇杰.力学所在格林菲斯理论对纳米尺度结构的适用性研究中获进展[J].中国材料进展,2015,03:252.
[3]王双双.我国大学本科生的专业选择权研究[D].苏州大学,高等教育学,2014,硕士.
[4]李冉.北京现代汽车ix35数字营销方案研究[D].河北工业大学,工商管理,2013,硕士.
[5]韩志英,陈敏,周志坚.安钢300m~3高炉强化冶炼实践[J].炼铁.1995(S1)
[6]张全.20世纪西方美术史家眼中的中国美术史述评[D].山东艺术学院,美术学,2012,硕士.
[7]李茜.犹太流亡戏剧在上海：1939-1947[D].北京大学,比较文学与世界文学,2013,硕士.
[8]李淼云.抑郁行为激活量表的修订及其测量特性的检验[D].西南大学,发展与教育心理学,2014,硕士.
[9]杨运强.基于工作流的行政审批管理系统的设计与实现[D].东北大学,计算机软件与理论,2010,硕士.
[10]刘骏.客户关系管理系统[J].嘉兴学院学报,2004,03:39-42.
[11]赵志跃.永康民营企业人力资源管理系统设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[12]孙玉红.穴位贴敷合捏脊疗法对小儿哮喘缓解期（肺脾气虚证）细胞因子的影响[D].黑龙江中医药大学,中医儿科学（专业学位）,2013,硕士.
[13]毛翔宇.智能型锂离子电池充电芯片XD0818的研究和设计[D].西安电子科技大学,电路与系统,2012,硕士.
[14]舒巧君.图的无圈边染色[D].苏州大学,运筹学与控制论,2014,博士.
[15]郑孝波.多分辨率三维地理空间模型的研究[D].西安科技大学,地图学与地理信息系统,2013,硕士.
[16]张娜娜.KIM-1对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞MCP-1和FN表达的影响[D].郑州大学,内科学,2013,硕士.
[17]苏伟.大跨径预应力混凝土连续梁桥施工监控分析[D].长安大学,建筑与土木工程（专业学位）,2013,硕士.
[18]刘艳芳.基于Bandelet变换的地震随机噪声去除[D].哈尔滨工业大学,应用数学,2013,硕士.
[19]孙贺廷.藏羚羊传染性胸膜肺炎和华南虎鼻气管炎的首次确诊与流行病学研究[D].东北林业大学,野生动植物保护与利用,2014,博士.
[20]万贤纲.5d过渡金属氧化物—Weyl半金属奇异量子物性研究[J].物理学进展,2014,01:28-46.
[21]周洪鹏.黑龙江省邮储银行小额信贷业务发展研究[D].东北农业大学,金融学,2013,硕士.
[22]李福元.MR导向腰椎间盘突出症细分型微创治疗策略选择[D].泰山医学院,影像医学与核医学,2012,硕士.
[23]李姣姣.WTO框架下我国渔业补贴法律制度研究[D].郑州大学,法律（专业学位）,2013,硕士.
[24]何利英.面向客户的供应链优化模型研究[D].西南交通大学,2003.
[25]赵泽坤.胃绕道手术治疗2型糖尿病的基础与临床研究[D].扬州大学,外科学,2011,硕士.
[26]张文明.燃油泵滑动轴承试验台测控系统的研制[D].合肥工业大学,动力工程,2013,硕士.
[27]谢丹.人造板企业成本预警系统研究[D].北京林业大学,林业经济管理,2013,硕士.
[28]张陶.云计算环境下节能任务调度策略研究[D].新疆大学,计算机软件与理论,2013,硕士.
[29]吴文.架上的出走与回归[D].沈阳师范大学,美术学,2013,硕士.
[30]昌超清.乌鲁木齐市荒山绿化建设现状及发展对策的研究[D].新疆农业大学,园林植物与观赏园艺,2012,硕士.
[31]辛玲玲.欧元区主权债务危机救助研究[D].山西财经大学,金融学,2013,硕士.
[32]焦涛.当代大学生公民素质教育问题研究[D].山东大学,思想政治教育,2013,硕士.
[33]吴鹏.浅析碳纳米材料及其在多相催化中的应用[J].电子制作,2015,05:218-219.
[34]徐明.基于传感器的上肢动作识别系统[D].安徽大学,电路与系统,2013,硕士.
[35]张磊.人工泪小管用PLLA/PCL/PEG共混材料的制备与性能[D].华中科技大学,化学工程,2013,硕士.
[36]高古辉,桂晓露,安佰锋,谭谆礼,白秉哲,翁宇庆.终冷温度对Mn系超低碳HSLA钢组织及低温韧性的影响[J].金属学报,2015,01:21-30.
[37]杨静.四通道高温超导心磁图诊断冠心病的临床初步研究[D].山西医科大学,心血管内科学,2013,硕士.
[38]牟鸿.11例多通道人工耳蜗植入的临床分析[D].青岛大学,耳鼻咽喉科学,2004,硕士.
[39]郭方铭.基于增强学习算法的智能排课模型[D].武汉理工大学,2004.
[40]马金一.回族健身操引入张家川回族自治县中学校本课程的可行性研究[D].中国矿业大学,体育教育训练学,2014,硕士.
[41]杨静.超轻量级密码PRESENT的差分功耗攻击及其防护[D].西南交通大学,信息安全,2013,硕士.
[42]许雅筠.漳州方言动词比较及特色分析[D].厦门大学,汉语言文字学,2014,硕士.
[43]牛蒙.中联重科国际化策略研究[D].兰州商学院,国际商务,2014,硕士.
[44]蔡杨.混合式步进电机在角位移测量中的应用研究[D].浙江工业大学,机械电子工程,2004,硕士.
[45]李庆.基于SOA的工作流技术在房地产资产评估管理中的应用[D].河南科技大学,计算机技术（专业学位）,2014,硕士.
[46]黄伟,张建华,张聪,刘自发,魏志连,潘东立.基于细菌群体趋药性算法的电力系统无功优化[J].电力系统自动化,2007,07:29-33.
[47]叶婧晶.后殖民翻译理论视角下《围城》中语言变异英译研究[D].浙江工商大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[48]葛俊锋,罗予频.非对称AdaBaost算法及其在目标检测中的应用(英文)[J].自动化学报,2009,11:1403-1409.
[49]连志贤.石墨烯修饰玻碳电极用于急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因检测的实验研究[D].福建医科大学,2011.
[50]王文海.张学良主政东北时期兴安区屯垦决策及实践研究[D].辽宁大学,中国近现代史,2012,硕士.